Cellculture

세포배양 (cellculture) 

1. 배양이란? 생체 조직을 생체 밖의 환경에서 어느 일정 기간 생육시키는 기술이다. 생명현상 해명을 위하여 세포, 조직을 독립된 생명체로 인식하고 분자 생물학 등 연구재료로 이용하기 위해 만들었다.  사용구조에 따라 기관배양(organ culture), 조직배양(tissue culture), 세포배양(cell culture)으로 나눌수있고 세포종류에 따라 초대배양(primary culture), 세포주 배양(cell line culture)로 나눌수있다. 

2. 배양의 분류
초대배양 & 세포주 배양

초대배양
정상조직이나 암조직으로 부터 바로 분리된 세포의 배양으로서 여러 세포종이 혼합된다. 원래의 세포기능을 유지한다는것이 장점이고 세포의 균일성, 재현성을 확신할 수 없다는것이 단점이다.

세포주 배양
무한 증식을 할 수 있는 세포로 현재는 단일 세포라는 개념이다. 

3. 배양시설

배양설비	사용용도
탄산가스 배양기(CO2 incubator)	pH조적은 배지의 중탄산 나트륨과 CO2가스의 평형에 의해 이루어진다. 5% CO2 - 95% air 유지 재킷형 CO2 incubator 주로 사용 - water 재킷(멸균수) : 온도 조절                                                            - 가습 vat : 습도 조절
배양실과 clean bench	배양실 :  무균실 clean bench : 무균조작을 위한 무균상자, 자외선 멸균장치 포함
배양 접시	culture flask - 배양용량이 큰 배양용기, screw cap부착 petri-dish - 조직배양용 dish(접착세포 배양), 일반세균 배양용dish(부유세포 배양) multi-well plate - 96 well 사용, 소량의 배양액
에어컨	온도조절
Inverted microscope	무염색 세포관찰
가압 증기 멸균기(autoclave)	멸균장치
Deep freezer	동결보존 -80도 유지
원심분리기	세포와 배양액의 분리
냉동냉장고	배지, 시약 등의 보존
cover slip	염색용
auto pipette	분주
혈구 게시판	세포수 측정

4.세포수 계산법
   1) 전세포수 계산
         culter counter
         혈구 계산판
   2) 생세포수 계산
         원리 : 색소 배제 능력   tryphan blue염색 - 사세포는 배제 능력이 없고 청색으로 염색한다.
         생세포율(%)  = (생세포수) / (생세포수 + 사세포수)
         생세포수(cell / ml) = 전세포수(cells / ml) X 생존율(%)