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위 과정이 계속 반복하여 진행되면서 (보통 25회~35회) 원하는 DNA 부분을 증폭시키는 것이 중합효소 연쇄반응의 원리이다.<br />
<br />
[[image : genomic.jpg]]<br /><br />A. Genomic DNA로부터 특정 유전자 부위의 증폭<br /><br />실험 방법<br /><br />1. 실험에 이용할 PCR 시험관에 다음과 같이 실험에 사용할 재료들을 혼합하고 pipette으로 잘 섞는다.<br /><br />Template DNA (100ng/ml) <strong>1ul</strong><br />Upstream primer (12.5pmole/ul) <strong>1ul<br /></strong>Downstream primer (12.5pmole/ul)<strong> 1ul<br /></strong>dNTP (dA, dC, dG, dT 2.5mM-each) <strong>2ul</strong><br />10x PCR 완충용액 <strong>5ul</strong><br />증류수 12.5pmole/ul) <strong>1ul</strong><br />Tap DNA polymerase (1 unit/ul) <strong>1ul</strong> (총 부피 <strong>50ul</strong>)<br /><br />* 10x PCR 완충용액 (100mM Tris-Cl, pH 8.3, 500mM KCl, 15~20 mM magnesium chloride, 0.01 % gelatin 또는 bovine serum albumin [BSA])은 효소에 딸려오는 것을 사용하면 되지만, MgCl2 농도를 변화시킬 필요가 있는 경우에는 Mg-free 완충용액을 사용해야 한다.</font></p>