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13) Slide sealing<br />
14) Optical microscope로 분석<br />
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Protocol 2<br />
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<strong>1. 목적 : <br />
</strong> - Intracellular phosphate residue의 indirect staining. Phosphorylation (인산화) state-specific Ab는 1) 단백질 내의 특정 residue가 인산화되었는지 확인하는데 유용하게 사용된다. 2) 인산화된 단백질의 세포내 위치 (subcellular localization) 결정한다<br />
- 단백질의 인산화는 단백질을 세포 내의 새로운 장소로 가게 한다. <br />
ex) membrane, focal adhesion, nucleus 등<br />
<br />
2. 재료 및 장비<br />
- Sample cells/ Stimulant<br />
- Glass slides and cover slips<br />
- PBS<br />
- 3.7% & 10% formaldehyde in PBS<br />
- 10% paraformaldehyde<br />
- 0.2% Triton X-100<br />
- Methanol<br />
- 0.06% Triton X-100/ PBS<br />
- 30% H2O2<br />
- 1% BSA<br />
- Primary Ab<br />
- Secondary Ab<br />
- GelMount<br />
- Fluorescent microscope<br />
- Goat serum<br />
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</font></font>