Refinement

Refinement

단백질의 정제는 세포의 외분비효소 또는 내분비효소, 세포물질등 자기가 원하는 단백질만을 선택적으로 
추출하는 방법으로 염석법, 투석법, 크로마토그래피, 전기영동(SDS-PAGE), 필터레이션등이 있다.
 염석법은 단백질 마다 염농도에 따른 침전정도가 다르므로 낮은 %의 염농도 부터 시작해서 점차적으로 
염의 농도를 올리면서 자기가 원하는 단백질이 침전되거나, 또는 필요없는 단백질은 모두 침전시키고 자기의 
단백질이 있는 상등액을 취해서 원심분리로 단백질을 획득할수도 있다. 높은 염농도에 의해 단백질의 효소 활성이 
사라질수도 있으므로 투석을통해 염을 제거한후 크로마토그래피를 하게된다.
 크로마토그래피에는 G-filteration, Affinity, Ion-exchange등이 있으며 수지에 따라서 그 종류가 아주 다양하다. 
전기영동을 단계별로 실시해 자기가 원하는 단백질만을 단일 밴드로 추출되었는지 확인해야 한다. 
만약 활성이 있는 enzyme에서 단일 밴드가 추출되었다면 그 밴드만을 뽑아내어 sequence를 분석하게 된다.