DMEM 배지 만드는 법
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DMEM 배지 만드는 법
( * 내가 만들고자 하는 배지는 10% FBS, p/s (penicillin, streptomycin), L-Glu 가 들어간 DMEM 배지)
준비물
10% FBS (25ml * 2개), p/s (5ml), L-Glu (5ml), DMEM (500ml, high glucose 사용)
방법
1) 10% FBS와 p/s, L-Glu를 DMEM이 든 병에 옮긴다. (pipette 이용해서) 10% FBS와 p/s, L-Glu 모두 얼려져 있는 상태이므로 녹이고 나서 반드시 resuspension 후, DMEM에 첨가한다. 특히 L-Glu는 녹인 후 보면 밑부분에 흰색의 분말이 가라 앉아 있는 것을 볼 수 있는데 resuspension을 잘 시켜 주면 분말이 없어져 투명해지는 것을 확인할 수 있다.
2) 멸균된 filter를 DMEM이 든 병 위에 끼운다.
3) Clean bench 내의 suction 호스를 filter에 끼워 진공 상태로 만들어 준다.
4) 배지를 filter에 붓는다.
5) 다 부은 후 filter를 배지가 든 용기로부터 천천히 분리한다.
