Blunt end를 sticky end로 전환하는 방법

1.linker
 blunt end인  double strand DNA에 짧은 염기를 붙여주는 방법이다.
이 짧은 염기서열은 중앙에 제한효소 절단 부분을 가지고 있어서 blunt end에 이 염기를 붙여준 후 제한효소로 잘라내면 sticky end가 될 수 있다.

2. adaptor
linker를 사용 못하는 경우 ( 짧은 염기서열을 자르를 제한효소인식 부분이 형질전환에 필요한 gene안에도 존재하여 사용 할 수 없을 때 이용한다.
먼저 단일 나선DNA를 합성한후 alkaline phosphatase를 처리하여 5프라임의 인산기를 제거한다. 그다음에 아래에 짧은 DNA를 붙여준다. 
 a. 5-GCCTCTCT-3 (먼저 임의로 긴 염기서열을 만들어 준후
 b, 5프라임에 있는 인산기를 제거한다.
 c. 5-GCCTCTCT-3를 주형으로 하는 짧은 DNA를 만들어 놓으면 알아서 붙어진다.
              3-AGAGA-5
 
3. homopolymertailing
terminal transferase를 이용하는 방법으로 blunt end인 끝부분에 이 효소를 이용하여 붙인다.
a. vetor에는 terminal trasferase와 dCTP를 넣으면 끝부분부터 계속 C만 첨가된다.
b. insert에는 terminal trasferase와 dGTP를 넣어서 끝부분 부터 계속  G만 첨가된다.

두개를 같이 두면 수소결합을 해서 서로 붙을 수 있다.