배양

From Opengenome.net
Revision as of 16:41, 23 January 2007 by Kjh (talk | contribs)
(diff) ← Older revision | Latest revision (diff) | Newer revision → (diff)

  배양기술의 가장 주된 목적은 유기체 내의 복잡한 상호작용을 제거하고 조절된 실험환경 내에서 세포를 연구하는 것이다. 세포와 조직배양 이론의 또 다른 장점은 살아있는 동물에서 수행될 실험을 대행할 수 있게 해준다는 것이다.
  세포가 성장하고 분화하는데 필요한 인자에 대한 지식의 증가로 인해 1970년대에 세포와 조직 배양기술은 꽃을 피우게 되었다. 조직배양기술은 세포가 유기체 내에서 경험하는 환경을 실험실 내에서 재현시기려는 시도이다.  그러므로 세포와 조직 배양에서 기본적인 것은 멸균, 독성물질 제거, 영양소, 적당한 전해질, 산소의 공금, 비타민, 호르몬 그리고 기본적이며 특별한 단백질 등의 다양한 보조인자(cofactor) 등이다.

배양원리 
소수이나 어떤 세포는, 예를 들어 myeloma cell 의 경우에는 세포의 침전을 막는 stirring mechanism이 있고공기가 적당한 플라스크의 현탄액에서도 잘 자란다. 그러나 대부분의 진핵세포는 생존을 위해 적당한 기질(substratum)에 붙어야만 한다. 그러므로 배양용기 (culture dish), petri dish류 또는 세포를 고정시킬 수 있는 넓은 표면을 지닌 flask에서 세포는 성장한다. 기본적으로 세포는 배양용기 바닥에 부착하는 특별한 성격을 갖는다. 플라스틱 제품은 암세포나 세포주(cell line)의 성장과 부착이 용이한 표면을 제공해 주기 우해 만들어진 것이다. 통상적으로 세포의 부착을 개선 하기 위하여  Polylysine(lysine의 잔여물로만 구성된 폴리펩티드)으로 코팅된 배양접시를 사용한다.  Polylysine이 코팅된 접시는 다양한 세포들의 배양에 적합하다. 그러나 고도로 분화된 세포는 보다 특별하고, 다양한 생리적 제공을 필요로 한다. 세포는 보다 완전한 유기체기질(substratum )에서 정상적으로 성장한다. 이러한 구성물 중 하나인 collagen이 코팅된 배양 접시가 오랫동안 사용되어 왔다. 이것은 보통 힘줄 ( tendons )에서 얻어진 것이며 basal lamina와 같이 원래의 기질에서 유래하는 것은 아니다. 
Laminin 과  fibronection과 같은 세포외부기질은 물론 collagen이나 type Ⅳ들을 사용하면 세포 성장을 대폭 향상시킬 수 있다. 그 외에도 부착물질로는 gelatin이 있다. 
  배지를 구성하는 첫번째 구성요스들은 Na+ 이온과 HCO-3 이온을 상대적으로 다량 함유하여 평형을 맞춘 전해질 그룹이다. 
  배지를  구성하는 두번째 요소들은 영양분이다.