Difference between revisions of "RT-PCR"
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Revision as of 18:16, 27 January 2006
RT-PCR (Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction)
특정부위 RNA를 주형으로 이에 상응하는 cDNA(complementary DNA)를 합성한 후에 PCR 증폭시키는 기술.
1.과정
1) reverse transcriptase를 이용하여 RNA로부터 cDNA를 제조 ; genomic DNA중에 특정유전자를 증폭시키는 것과 방법동일
2) cDNA를 이용하여 특정부위를 증폭시킴
2. 장점
이 방법은 Northern hybridzation과 같은 방법을 통해 가능하던 RNA 분석보다 더욱 실험방법이 간단하며 유전자의 염기서열 까지도 결정이 가능하기 때문에 주로 mRNA의 염기서열 및 전사량을 연구할 때 크게 도움이 된다.
염기서열이 알려진 유전자의 경우 RT-PCR을 통해서 전체 길이의 cDNA를 간단하게 합성해 cloning할 수 있다.