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항체에 결합되는 효소 중에는 간단한 기질 용액을 넣어주면 색깔을 띄는 반응이 이용되는데, 대표적인 효소로는 염기성인산분해효소 (alkaline phosphatase) 나 양고추냉이 과산화효소 (horseradish peroxidase, HRP) 등이 많이 이용되고 있다. 이들 효소는 항체 분자의 Fc 지역에 공유결합되도록 화학 반응을 이용하여 결합시켜 사용한다.<br />

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direct method는 항원과 반응하는 항체에 바로 효소를 결합시켜 사용하는 방법을 말한다.<br />

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항원과 결합하는 항체 (1차항체, primary antibody)&nbsp;에는 효소가 없고, 그 항체와 결합하는 항체 (2차항체, secondary antibody) 에 효소가 결합되어 있는 분석방법. 일반적으로 isotype에 대한 항체에 효소가 결합된 형태 (enzyme conjugated anti-isotype antibody, 예를 들어 alkaline phosphatase conjugated anti-mouse IgG&nbsp;등) 으로 판매되고 있으며, 자신이 이용하는 일차항체의 급 (isotype)&nbsp;에 맞는 효소결합항체를 구입하여 사용하면 된다.&nbsp;<br />

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항원이 plate에 잘 결합하도록, 항원에 대한 항체를 먼저 플레이트에 결합시키고, 그 항체에 항원을 결합시킨 다음, 직접법이나 간접법으로 조사하는 방법이다. 항원의 양이 적을&nbsp;때 또는 미지의 샘플에 들어 있는 항원을 조사할 때 사용한다.<br />