Difference between revisions of "Antibidy (항쳬)"
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| − | - Ag의 정확한 subcellular (세포 이하의) 위치를 파악하고, 정확한 농도로 반응<br /> | + | </font></strong>- Ag의 정확한 subcellular (세포 이하의) 위치를 파악하고, 정확한 농도로 반응<br /> |
- Ag과 작용하는 다른 molecule까지 포함<br /> | - Ag과 작용하는 다른 molecule까지 포함<br /> | ||
- Ab 생산 ; 특정 Ag을 실험 동물에게 주입, serum sample을 얻음<br /> | - Ab 생산 ; 특정 Ag을 실험 동물에게 주입, serum sample을 얻음<br /> | ||
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| − | Serum은 서로 다른 epitope상의 Ag과 binding하는 Ab 집단을 말함<br /> | + | <br /> |
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- epitope : Ag상에서 Ab가 binding하는 부위<br /> | - epitope : Ag상에서 Ab가 binding하는 부위<br /> | ||
- 특정의 epitope을 인식하는 Ab의 개별 type은 plasma cell (혈장 세포)의 서로 다른 clone에 의해 생산됨 -> 각각의 plasma cell은 오직 하나의 epitope에만 binding하는 Ab를 분비<br /> | - 특정의 epitope을 인식하는 Ab의 개별 type은 plasma cell (혈장 세포)의 서로 다른 clone에 의해 생산됨 -> 각각의 plasma cell은 오직 하나의 epitope에만 binding하는 Ab를 분비<br /> | ||
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2) spleen cell 분리 -> plasma cell + myeloma cell fusion -> htbridoma -> select -> clone들로부터 monoclonal Ab를 얻음 (tissue culture supernatant로 사용됨)<br /> | 2) spleen cell 분리 -> plasma cell + myeloma cell fusion -> htbridoma -> select -> clone들로부터 monoclonal Ab를 얻음 (tissue culture supernatant로 사용됨)<br /> | ||
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| − | <td> Ab source</td> | + | <td bgcolor="#cccccc"> <strong>Ab source</strong></td> |
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| − | <td> Total Ab concentration</td> | + | <td bgcolor="#cccccc"><strong> Total Ab concentration</strong></td> |
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<td> polyclonal</td> | <td> polyclonal</td> | ||
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| − | <td> Tissue culture<br /> | + | <td> <strong>Tissue culture<br /> |
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<td> monoclonal</td> | <td> monoclonal</td> | ||
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| − | <td> Ascites (복수)</td> | + | <td> <strong>Ascites (복수)</strong></td> |
<td> monoclonal</td> | <td> monoclonal</td> | ||
<td> 1~10 mg/ml</td> | <td> 1~10 mg/ml</td> | ||
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| + | </strong>- secreted glycoprotein<br /> | ||
| + | - Y자 형태의 characteristic unit을 한 개 또는 그 이상 가진다<br /> | ||
| + | - IgG : 오직 하나의 Y unit, serum 내에 가장 많이 존재하는 immunoglobulin<br /> | ||
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| + | </strong>1) Ag binding region<br /> | ||
| + | 2) Fab domain (fragment having the Ag binding site) : 2개의 Ag binding domain의 lateral, rotational movement에 관여 (다른 Ag과 binding할 수 있도록)<br /> | ||
| + | 3) Fc domain (fragment that crystalizes) : immune response에 중요 ( ex. macrophage와의 interaction, activation of complement 등)<br /> | ||
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| + | <strong><font style="BACKGROUND-COLOR: #ffff99">IgG protein은 2개의 heavy chain polypeptide (Hc, 55000 Da) 와 2개의 light chain polypeptide (Lc, 25000Da) 로 구성</font><br /> | ||
| + | </strong>1개의 Lc -> Hc의 amino terminal과 interaction -> Ag binding site<br /> | ||
| + | 2개의 Hc의 carboxyl terminal region은 서로 fold -> Fc domain<br /> | ||
| + | 4개의 Hc, Lc -> covalent disulfide bridge & noncovalent bond로 결함<br /> | ||
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Revision as of 19:44, 9 November 2006
Antibody (항체, 이하 Ab)는 높은 친화력으로 주어진 Antigen (항원, 이하 Ag)에 붙을 수 있는 유용한 반응물
- Ag의 정확한 subcellular (세포 이하의) 위치를 파악하고, 정확한 농도로 반응
- Ag과 작용하는 다른 molecule까지 포함
- Ab 생산 ; 특정 Ag을 실험 동물에게 주입, serum sample을 얻음
Serum은 서로 다른 epitope상의 Ag과 binding하는 Ab 집단을 말함
- epitope : Ag상에서 Ab가 binding하는 부위
- 특정의 epitope을 인식하는 Ab의 개별 type은 plasma cell (혈장 세포)의 서로 다른 clone에 의해 생산됨 -> 각각의 plasma cell은 오직 하나의 epitope에만 binding하는 Ab를 분비
- Serum 내의 Ab 집단은 많은 종류의 서로 다른 Ab-producing plasma cell에 의해 생산됨
Ag -> mouse -> 1) serum 분리 -> polyclonal Ab (immunochemical technique에 가장 많이 쓰임)
2) spleen cell 분리 -> plasma cell + myeloma cell fusion -> htbridoma -> select -> clone들로부터 monoclonal Ab를 얻음 (tissue culture supernatant로 사용됨)
* Commonly used sources of antibodies *
| Ab source | Ab type | Total Ab concentration | Specific Ab concentration | Contaminating |
| Serum | polyclonal | 10 mg/ml | normally less than 0.5 mg/ml | other serum Abs |
Tissue culturesupernatantwith 10% FBS |
monoclonal | 1 mg/ml | 0.05 mg/ml | Calf Abs |
| Ascites (복수) | monoclonal | 1~10 mg/ml | 0.9~9 mg.ml | Mouse Abs |
Ab는 1) Ag binding site와 2) cell-binding region으로 구성된다
- secreted glycoprotein
- Y자 형태의 characteristic unit을 한 개 또는 그 이상 가진다
- IgG : 오직 하나의 Y unit, serum 내에 가장 많이 존재하는 immunoglobulin
* IgG : 3개의 protein region을 가짐 (protease papain으로 3 부분이 잘림)
1) Ag binding region
2) Fab domain (fragment having the Ag binding site) : 2개의 Ag binding domain의 lateral, rotational movement에 관여 (다른 Ag과 binding할 수 있도록)
3) Fc domain (fragment that crystalizes) : immune response에 중요 ( ex. macrophage와의 interaction, activation of complement 등)
IgG protein은 2개의 heavy chain polypeptide (Hc, 55000 Da) 와 2개의 light chain polypeptide (Lc, 25000Da) 로 구성
1개의 Lc -> Hc의 amino terminal과 interaction -> Ag binding site
2개의 Hc의 carboxyl terminal region은 서로 fold -> Fc domain
4개의 Hc, Lc -> covalent disulfide bridge & noncovalent bond로 결함
