Difference between revisions of "CDNA"

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Revision as of 15:42, 23 January 2006

mRNA는 상당히 불안전한 상태이기 때문에 장기 보관이 어렵다. 
따라서 역전사 효소를 이용하여 DNA를 만들어 보관할때나 
DNA상에 존재하는 인트론부분이 제거된 순수 엑손부위만 얻기 위하여 (진핵생물의 유전자에는 인트론이라는 단백질로 암호화 되지않은 부분이 많이 삽입되어있으며 이 DNA를 주형으로 하여 1차 RNA가 전사된 후에 프로세싱과정을 거쳐서 인트론 부분은 제거가 되고 완전한 mRNA가 만들어 진다.)
mRNA를 주형으로 DNA를 만든것을 cDNA라 부른다.  

cDNA의 합성
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① cDNA를 만들기 위해서는 우선 mRNA를 조직으로부터 추출한다.
② 역전사 효소와 디옥시리보뉴클레오티드를 첨가하여 mRNA 사슬을 주형으로 하여 1차 DNA 가닥이 복사된다(DNA-RNA 혼성체 형성).
③ RNA 분해효소 (RNase H)를 처리하여 DNA-RNA 혼성 double strands로부터 mRNA를 제거한다.
④ DNA중합효소를 처리하여 역전사에 의해 만들어진 DNA 가닥을 주형으로 하여 DNA의 두 번째 가닥을 만든다.