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<strong><font style="BACKGROUND-COLOR: #ffff99">Antibody (항체, 이하 Ab)는 높은 친화력으로 주어진 Antigen (항원, 이하 Ag)에 붙을 수 있는 유용한 반응물<br /></font></strong>- Ag의 정확한 subcellular (세포 이하의) 위치를 파악하고, 정확한 농도로 반응<br />
- Ag과 작용하는 다른 molecule까지 포함<br />
- Ab 생산 ; 특정 Ag을 실험 동물에게 주입, serum sample을 얻음<br />
<br />
<br /><strong><font style="BACKGROUND-COLOR: #ffff99">Serum은 서로 다른 epitope상의 Ag과 binding하는 Ab 집단을 말함</font></strong><br />
- epitope : Ag상에서 Ab가 binding하는 부위<br />
- 특정의 epitope을 인식하는 Ab의 개별 type은 plasma cell (혈장 세포)의 서로 다른 clone에 의해 생산됨 -> 각각의 plasma cell은 오직 하나의 epitope에만 binding하는 Ab를 분비<br />
2) spleen cell 분리 -> plasma cell + myeloma cell fusion -> htbridoma -> select -> clone들로부터 monoclonal Ab를 얻음 (tissue culture supernatant로 사용됨)<br />
<br />
<br /><strong><font style="BACKGROUND-COLOR: #ffff99">* Commonly used sources of antibodies *<br /><br /></font></strong>
<table style="WIDTH: 734px; HEIGHT: 63px" cellspacing="1" cellpadding="1" width="734" summary="" border="1">
<tbody>
<tr>
<tdbgcolor="#cccccc"> <strong>Ab source</strong></td> <tdbgcolor="#cccccc"><strong> Ab type</strong></td> <tdbgcolor="#cccccc"><strong> Total Ab concentration</strong></td> <tdbgcolor="#cccccc"><strong> Specific Ab concentration</strong></td> <tdbgcolor="#cccccc"><strong> Contaminating</strong></td>
</tr>
<tr>
<td> <strong>Serum</strong></td>
<td> polyclonal</td>
<td> 10 mg/ml</td>
</tr>
<tr>
<td> <strong>Tissue culture<br />
supernatant <br />
with 10% FBS</strong></td>
<td> monoclonal</td>
<td> 1 mg/ml</td>
</tr>
<tr>
<td> <strong>Ascites (복수)</strong></td>
<td> monoclonal</td>
<td> 1~10 mg/ml</td>
</tbody>
</table>
<br />
<br />
<strong><font style="BACKGROUND-COLOR: #ffff99">Ab는 1) Ag binding site와 2) cell-binding region으로 구성된다</font><br />
</strong>- secreted glycoprotein<br />
- Y자 형태의 characteristic unit을 한 개 또는 그 이상 가진다<br />
- IgG : 오직 하나의 Y unit, serum 내에 가장 많이 존재하는 immunoglobulin<br />
<br />
<br />
<strong><font style="BACKGROUND-COLOR: #ffff99">* IgG : 3개의 protein region을 가짐 (protease papain으로 3 부분이 잘림)</font><br />
</strong>1) Ag binding region<br />
2) Fab domain (fragment having the Ag binding site) : 2개의 Ag binding domain의 lateral, rotational movement에 관여 (다른 Ag과 binding할 수 있도록)<br />
3) Fc domain (fragment that crystalizes) : immune response에 중요 ( ex. macrophage와의 interaction, activation of complement 등)<br />
<br />
<br />
<strong><font style="BACKGROUND-COLOR: #ffff99">IgG protein은 2개의 heavy chain polypeptide (Hc, 55000 Da) 와 2개의 light chain polypeptide (Lc, 25000Da) 로 구성</font><br />
</strong>1개의 Lc -> Hc의 amino terminal과 interaction -> Ag binding site<br />
2개의 Hc의 carboxyl terminal region은 서로 fold -> Fc domain<br />
4개의 Hc, Lc -> covalent disulfide bridge & noncovalent bond로 결함<br />
<br />
<br />
<br />
