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<strong>② 단백질 실험의 포인트</strong> <br /font><br /> 위와 같은 연구의 진행 방향이 결정되면 다음은 어떻게 하면 실험을 잘 할 수 있을 지가 중요하다. 단백질을 취급하는데 있어 특히 중요하다고 생각되는 기본적인 사항을 명심하여야 한다. <br />
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무엇보다도 첫번째로 목적 단백질의 양을 가능한 한 정확하고 간단하게 측정이 가능한 검정계를 가지는 것이다. 실험 재료중의 전 단백질 양과 목적 단백질의 양을 언제든지 가능한 한 정확하게 알고 있을 필요가 있다. 전체의 단백질 성분에 대해서는 SDS-PAGE법과 이차원 전기 영동법으로 간단하게 분석할 수가 있다.<br />
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두번째로서, 좋은 실험 재료를 선택하는 것이다. 좋은 재료라는 것은 단순히 목적 단백질의 함량이 높다는 것만이 아니고 다른 불순물 단백질에 비하여 목적 단백질의 함량이 높은 재료를 의미한다, 이를 위해서는 목적 단백질의 조직분포나 세포내 분포를 확실하게 검토하여 둘 필요가 있다. <br />
<br /> 세번째는 단백질의 일반적인 성질뿐만이 아니라 목적 단백질 고유의 성질을 파악하는 것이다. 모든 단백질은 특정의 입체구조를 갖게됨으로서 처음으로 고유의 기능을 보여줄 수가 있다, 그래서 단백질의 생리활성을 분석하기 위해서는 단백질 입체구조의 파괴(변성)와 단백질분해효소에 의한 분해를 최소한으로 억제해야 한다. <br /><br /> 많은 단백질은 열, pH, 변성제 및 산화 등에 의하여 용이하게 변성하고 활성을 잃는다. 화학시약을 용해하기 위해서는 가열하고 교반하지만, 단백질을 취급할 경우에는 ice bucket, 저온실이나 냉장고에서 1~5℃로 냉각해서 처리하는 것을 원칙으로 한다, 교반도 가능한 한 거품이 나지 않도록 조용하게 해야한다. 조직 추출액중의 단백질을 안정하게 유지하기 위해서는 용약을 저온으로 유지하는 것과 동시에 효소 저해제, 안정화 시약 등의 첨가가 필요한 경우가 많다, 또한 불안정한 단백질에 대해서는 시간도 중요한 factor이다. 일련의 실험은 가능한 한 짧은 시간에 행하지만, 그렇지 못할 경우 실험을 장기간 중단하는 경우에는 freezer이나 초저온고에 동결보존 하다. 정제 단백질을 장기보존 하는 경우에는 분주해서 동결보존하지만 단백질에 따라서는 동결건조해서 냉장고에 보존하는 것이 무난하다. 또한 단백질을 정제하거나 처리하는 것 이상으로 그 단백질의 성질 (등전점, 분자량, pH 안정성, 흡착성 및 특정의 물질에 대한 결합성 등)을 알고 있는 것도 매우 중요하다. <br /> 이상과 같이 기본적인 사항과 더불어 개개의 실험을 얼마나 잘 수행하였는지가 연구의 성패를 결정하는 중요한 포인트가 되는 것은 말할 필요도 없다. 모든 실험기술에는 one point사 있다. 실험을 잘 할 수 있기 위해서는 그 방법의 원리를 이해하고 실험 과정을 습득하는 것이 매우 중요하다.<br /> </font>
