2D‐PAGE
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2D-PAGE(polyacrylamide gel electrophoresis)
2차원 전기영동은 단백질을 SDS-PAGE 처럼 분자량을 기준으로 분리한다음 등전점을 기준으로
다시 분리를 하는 방법이다. SDS-PAGE를 하게되더라도 하나의 밴드에 많은 단백질이 있을수 있으며
이를 다시 등전점을 기준으로 분리하게 되면 각각 분리가 가능하다.
2D-PAGE의 장점
- 발현 후 변형 과정에서 발생되는 단백질의 인산화 변이체와 정상적인 단백질을 서로 분리가능하다.
- 최근에는 고정화 pH구배법을 이용하기 때문에 그 재현성이 높다.
- 형광염료 등을 단백질에 착색시켜 민감도와 해상도를 고도화시킬수 있다.
- 자동화된 점적(spot) 검출기의 사용이 용이하다.
- 화상분석기법의 조합을 통한 신속한 단백체의 주석 달기, 그리고 복합물들의 분리 조사가 가능하다.
2D-PAGE의 단점
- 커다란 소수성의 단백질 분리는 현재까지 어렵다.
- 강산성이나 강염기의 특성을 지니는 단백체들은 분리가 어렵다.
- 낮은 발현빈도를 지니는 단백체들에 대한 분석은 현재까지 어렵다.
- 혈청단백질의 경우 알부민성 단백질의 과다 존재로 인하여 다른 단백체들에 대한 분리가 어렵다.
- 실험 시간이 많이 걸린다.
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