특정 유전자에 원하는 유전자를 삽입을 시켜서 그 특정유전자의 기능을 상실 시키는 방법

이때 사용하는 유전자는 lac Z오페론을 사용하게 된다. 
이 오페론[에는 
         lacZ repressor                                         promoter                     operator                      lacZ                      lacY                    lacA

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이런 순서로 되어 있는데 이 유전자는 락토즈를 분해하는 효소를 만들어 내는 것으로 만약 락토즈가 없으면 repressor에서 나오는 단백질이 operator에 결합을 하게 되어 뒤에 있는 lacZ,Y,A의 단백질이 만들어 질 수 없게 된다. 

이 실험에서 사용되는것은 lacZ의 유전자로 이 유전자에서 만들어진 단백질인 베타 갈락토시다아제의 활성을 이용하게 된다.

1.박테리아 안에 있는 lacZ의 일부분을 잘라낸다.
2.lacZ의 일부분을 벡터에 삽입을 한다. 
> 이 두개의 유전자가 같이 있어야 완벽한 베타갈락토시다아제를 만들어 낼 수 있다.
3. 락토즈와 유사한 물질인 X-gal을 넣는다. 이것이 벡타갈락토시다아제로 분해가 되면 파란색을 띄고 잘라내지 못하면 하얀색을 띈다.
    그리고 IPTG를 첨가하여 리프레서가 오퍼레이터에 결합하지 못하도록 막는다.
4. 벡터에 들어있는 lacZ의 일부분에 유전자를 삽입을 하여 베타갈락토시다아제가 만들어 지지 못하게 만든다.
5. 만약 벡터의 lacZ의 일부분에 유전자가 삽입이 되었다면 lacZ의 기능을 할 수 없어서 X-gal을 분해 시킬 수 없다.
    따라서 하얀색을 띄게 된다.