계대배양 목적및 방법
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초대배양을 하면 여러종류의 세포가 함께 섞여 있다. 따라서 유전적으로 동일한 세포를 선별해야 해야 한다.
1. 세포용액을 희석시킨다. 약 10~ 100cells/ml
2. 여러개의 plate가 있는 용기에 세포를 넣는다.
3. 세포를 침전시킨다.
4. 세포의 종류별로 키운후 클론을 만든다.
5. 이 클론을 선별해서 계대배양을 한다.
세포를 희석하면 성장에 장애를 일으킬 수 있으므로 다음과 같은 물질을 첨가한다.
1. 성장호르몬을 첨가하거나.
2. 성장요소를 첨가하거나.
3. feeder cell위에 세포를 키우는데 이 feeder cell은 더이상 성장이나 분열은 하지 않지만 이것이 분비하는 호르몬이 세포를 키울 수 있다.
